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    PCR的黃金搭檔——Taq DNA聚合酶

    2022-08-26 16:33:31

      PCR(聚合酶鏈式反應)是由美國PE-Cetus公司發明的一種體外促進特異性DNA片段合成的生物檢測技術,廣泛應用于生物科學研究領域中。

      PCR技術主要有①高溫變性:在94℃的溫度下促使提取的原始DNA雙鏈(模板)及擴增得來的雙鏈DNA解離,成為單鏈,為后續擴增做準備;②低溫退火復性:在55℃的條件下,解開的DNA單鏈與上下游引物結合;③適溫延伸:DNA模板-引物結合物在Taq DNA聚合酶的作用下,以dNTP為原料,順著引物繼續延伸生成一條與模板DNA配對的復制鏈這三個基本步驟。這三個步驟周而復始、不斷循環,上一循環生成的新DNA鏈又成為下一次循環的模板,短時間內就能將目的基因擴增幾十萬甚至幾百萬倍!

      如此精妙的生物科技手段一度讓科學家們犯了難,PCR技術對溫度的嚴格要求對各反應原料都提出了挑戰,尤其是DNA聚合酶,因為大多數酶都在高溫時變性失活。DNA聚合酶相當于“針線”,將一個個單獨的核苷酸“縫”在DNA模板鏈上。最開始時PCR反應使用的酶是從大腸桿菌中分分離的Klenow酶,雖然耐熱,但是不耐高溫,每個循環都要重新添加一次酶,嚴重阻礙了PCR技術的普及推廣,直至在一種水生棲熱菌中提取出Taq DNA聚合酶,這種酶在90℃以上仍能保持活性,變性溫度在95℃20秒的情況下,50個循環后保有50%的酶活性,所以稱它為PCR反應的“黃金搭檔”也不為過。

      河北三獅生物科技有限公司研制生產的2×Taq PCR Master Mix(Taq酶預混液),科學配比添加了DNA Ploymerase、PCR Buffer及dNTP Mix等多種PCR原料,有含染料與不含染料(電泳時所必需的色素試劑)兩種供您選擇,您只需要添加模板、上游引物、下游引物和dd水便可進行PCR反應,靈敏度高,特異性強,線性范圍廣,簡單方便。


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