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    帶你了解PCR技術的核心奧秘

    2022-08-26 16:31:21

      生命復雜又神奇,人們一直想解開這個大自然的謎題,而復雜的分子機理卻限制住了人們熱切的求知欲。里程碑式的分子生物學技術——PCR(聚合酶鏈式反應,polymerase chain reaction)技術可以說開創了生物學的新時代,帶領著我們走上了現代分子生物學的巨船。讓我們向它的開創者——Kary Mullis致以我們最高的尊崇!那么我們不禁要問,PCR技術到底有什么神奇的地方值得我們將其的地位擺的如此之高呢?

      我們先來了解一下DNA的相關信息。DNA是雙螺旋結構,通過堿基互補配對的方式結合,A與T配對,C與G配對,從而將兩條鏈牢牢“鎖”在一起。當DNA進行復制時,雙鏈解開,以其中任意一條鏈為模板,以游離的脫氧核苷酸——即ATP、GTP、UTP、CTP為原料,沿著5’端向3’端拼湊延伸,直到延伸成一條完整單鏈與模板單鏈形成一個新的雙螺旋DNA結構。生命體的秘密就藏在這一段段DNA分子中,只有得到了大量DNA才能供給研究分析。

      PCR技術就是一種生物體外進行大量DNA復制的技術,簡單快速就可將我們需要的DNA序列進行指數級擴增,大大推動了了分子生物領域的研究進度。想要學習PCR技術就必須知道PCR技術的三個核心組分,三個關鍵步驟。

      三個核心組分——引物、dNTP和DNA連接酶。引物就是一段長15-20個堿基的DNA片段,引物根據我們的目的DNA序列進行特定設計,達到與目的DNA序列互補,并能結合到目的DNA序列的特定位置。等引物粘合到序列上后,dNTP即脫氧核糖核苷酸則排上用場,它是DNA復制的原料,DNA連接酶將一個個脫氧核苷酸連接起來,沿著引物繼續向后延伸。

      而三個關鍵步驟就是變性、退火和延伸。變性就是加熱PCR混合后的體系,使雙螺旋結構的DNA解旋分離成兩條單鏈。退火溫度因引物不同而不同,當冷卻PCR混合體系至55℃到70℃不等時,DNA單鏈重新恢復粘性,與引物結合。延伸就是DNA聚合酶利用dNTP原料,沿著引物將序列填充補齊,完成DNA復制過程。

      現在,PCR技術已經滲透到醫藥、食品、農業、畜牧業等眾多行業中,應用相當廣泛。河北三獅生物科技有限公司經營各種基礎科研試劑,推出普通PCR和Real-time PCR全線產品,更有全自動核酸提取儀,實時熒光定量PCR儀各種儀器和多款“明星”爆品,為您打造核酸檢測整體解決方案。


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